摘要：目的:采用酵母雙雜交技術(shù),篩選PRR11的相互作用蛋白,為深入研究其分子行為機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法:構(gòu)建用于酵母雙雜交篩選的PRR11誘餌質(zhì)粒并檢測其自激活作用,根據(jù)結(jié)果進(jìn)一步構(gòu)建突變體獲得具有較低自激活作用的突變體。對(duì)人胎腦cDNA文庫進(jìn)行篩選,獲得初始陽性克隆。通過LacZ報(bào)告基因檢測、回轉(zhuǎn)驗(yàn)證、陽性克隆測序及BLAST序列比對(duì)分析,排除假陽性克隆和重復(fù)克隆,確定PRR11的候選相互作用蛋白。結(jié)果:PRR11具有自激活作用,構(gòu)建了一個(gè)較低自激活作用的PRR11突變體。通過酵母雙雜交篩選,獲得102個(gè)初始陽性克隆轉(zhuǎn)化子。經(jīng)LacZ報(bào)告基因檢測,將陽性克隆鎖定至39個(gè)。通過測序和序列比對(duì)分析,證實(shí)這39個(gè)克隆屬于編碼15種不同蛋白的基因。最終有RNF41等4個(gè)蛋白通過回轉(zhuǎn)驗(yàn)證。結(jié)論:RNF41、SCG5、BCYRN1和PRR13是PRR11的潛在相互作用蛋白。