摘要：目的 探究Nanog啟動(dòng)子-332/＋50區(qū)與雙熒光素酶報(bào)告載體pGL4.10連接后負(fù)向調(diào)節(jié)Nanog-135/-230區(qū)活性的調(diào)節(jié)序列。方法 截短法將Nanog啟動(dòng)子-812-＋171區(qū)不同片段與pGL4.10載體連接,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將各載體分別與內(nèi)參載體pRL-TK共轉(zhuǎn)入細(xì)胞,雙熒光素酶系統(tǒng)報(bào)告系統(tǒng)檢測(cè)報(bào)告基因的表達(dá)變化。結(jié)果 Nanog啟動(dòng)子-812/-332區(qū)、＋50/＋171區(qū)及-332/＋51（或＋56）區(qū)均不含Nanog-135/-230區(qū)的負(fù)向調(diào)控元件,改變Naong-332/＋50區(qū)與報(bào)告載體pGL4.10的連接位點(diǎn)（NheⅠ,BglⅡ）行成序列“-GCT（A）GCGAGATC-”即可消除Nanog啟動(dòng)子-332/＋50對(duì)報(bào)告基因的正向調(diào)控作用。結(jié)論 待檢測(cè)啟動(dòng)子與載體連接構(gòu)成“-GCT（A）GCGAGATC-”序列后可負(fù)向調(diào)控Nanog-135/-230區(qū)的活性。