摘要：目的探討泛素樣含PHD和環(huán)指結(jié)構(gòu)域1(Ubiquitin like with PHD and ring finger domains 1,UHRF1)在肺腺癌(Lung adenocarcinoma)細胞的增殖、自噬中的作用及其潛在機制。方法通過生物信息學網(wǎng)站(TCGA)檢測UHRF1在肺腺癌組織中的表達。qRT-PCR和Western blot檢測肺腺癌細胞系(PC-9、A549和H1299)以及人支氣管上皮細胞(16HBE)中UHRF1的表達。轉(zhuǎn)染UHRF1-shRNA后,采用CCK-8、克隆形成以及Ki-67檢測肺腺癌A549細胞活性和增殖能力的改變;蛋白免疫印記檢測自噬相關LC3-I/II、Beclin-1蛋白以及增殖相關蛋白CDK6、Rb和PCNA蛋白的變化;透射電鏡觀察敲除UHRF1后A549細胞中對于自噬小體的影響。結(jié)果在肺腺癌患者組織中UHRF1表達明顯高于癌旁組織,而相對于正常的支氣管上皮細胞16HBE,肺腺癌細胞系A549與H1299中UHRF1的mRNA和蛋白水平均明顯升高。此外,CCK-8法和克隆形成實驗表明沉默UHRF1能夠降低肺腺癌細胞系A549的生長效率。Ki-67免疫熒光法檢測結(jié)果顯示敲除UHRF1后A549細胞增殖能力相對于正常對照組明顯降低。此外我們發(fā)現(xiàn),敲除UHRF1導致CKD6和PCNA蛋白水平相對于Control-siRNA組表達升高,而Rb蛋白表達下調(diào)。我們同時還發(fā)現(xiàn),沉默UHRF1后能夠提高LC3-II/LC3-I的比例,誘導Beclin-1的表達上調(diào)。沉默UHRF1促進A549細胞中自噬小體的形成。結(jié)論UHRF1在肺腺癌中高表達,沉默UHRF1能夠發(fā)揮抑制增殖的作用。而這種作用可能是通過促進細胞自噬產(chǎn)生的。