摘要：利用多重光譜技術(shù)(熒光光譜、同步熒光光譜、紫外-可見光譜、傅里葉變換紅外光譜)研究VD3與大豆分離蛋白的相互作用。結(jié)果表明:VD3能對(duì)大豆分離蛋白的內(nèi)源熒光進(jìn)行靜態(tài)猝滅。VD3與大豆分離蛋白在不同溫度下相互作用的表觀結(jié)合常數(shù)分別為1.245×10^4(293 K)、1.250×10^4(298 K)、3.531×10^4(306 K)L/mol,對(duì)應(yīng)的結(jié)合位點(diǎn)數(shù)分別為0.9733、0.9924和1.0942;結(jié)合距離r=2.92,其結(jié)合時(shí)通過非輻射能力轉(zhuǎn)移而促使蛋白質(zhì)熒光猝滅。熱力學(xué)數(shù)據(jù)分析結(jié)果表明:VD3與大豆分離蛋白的反應(yīng)是自發(fā)的吸熱過程,其相互作用的主要作用力是靜電相互作用和疏水相互作用。同步熒光光譜和紫外-可見光譜結(jié)果顯示,VD3的添加使大豆分離蛋白構(gòu)象發(fā)生改變,芳香氨基酸殘基的微環(huán)境由疏水性向親水性變化。傅里葉變換紅外光譜結(jié)果表明VD3引起大豆分離蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。