利用CRISPR/Cas9構(gòu)建斑馬魚tbx20基因突變體及其功能分析
作者：朱哲; 胡沛男; 李偉明; 祖堯 上海海洋大學(xué)科技部海洋生物科學(xué)國際聯(lián)合研究中心; 上海201306; 上海海洋大學(xué)水產(chǎn)種質(zhì)資源發(fā)掘與利用教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 上海201306; 上海海洋大學(xué)水產(chǎn)科學(xué)國家級(jí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心; 上海201306
摘要：轉(zhuǎn)錄因子TBX20在脊椎動(dòng)物心臟的腔室發(fā)育和維護(hù)中起至關(guān)重要的作用。利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)成功制備了斑馬魚tbx20突變魚系,T7E1檢測結(jié)果顯示F0敲除效率平均為42. 1%,測序分析F1中突變種質(zhì)遺傳效率為36. 7%。F2突變體中觀察到心臟突變表型:48 hpf,心包腔腫大,靜脈竇瘀血,環(huán)化異常,心臟結(jié)構(gòu)變形;3 dpf,心臟畸形拉伸成線狀結(jié)構(gòu)。原位雜交和qRT-PCR結(jié)果顯示,突變體中vmhc表達(dá)上調(diào),amhc和myl7表達(dá)下調(diào)。成功制備了斑馬魚tbx20突變體,結(jié)果表明tbx20純合突變體心臟畸形,環(huán)化受到影響,為深入探究tbx20在早期心臟腔室分化過程中的作用奠定了基礎(chǔ)。
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上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào)雜志， 雙月刊，本刊重視學(xué)術(shù)導(dǎo)向，堅(jiān)持科學(xué)性、學(xué)術(shù)性、先進(jìn)性、創(chuàng)新性，刊載內(nèi)容涉及的欄目：水產(chǎn)生物技術(shù)、水產(chǎn)養(yǎng)殖、水產(chǎn)營養(yǎng)與飼料、水域環(huán)境與保護(hù)、漁業(yè)資源與可持續(xù)捕撈、漁業(yè)工程、水產(chǎn)食品科學(xué)、海洋藥物等。于1992年經(jīng)新聞總署批準(zhǔn)的正規(guī)刊物。
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