摘要:目的 建立一種適合現(xiàn)場使用、靈敏、特異的腦膜炎奈瑟菌(N.men)檢測方法。 方法 針對N.men的ctrA基因設(shè)計環(huán)介導等溫擴增(LAMP)特異性引物和核酸侵入反應探針,對LAMP擴增產(chǎn)物進行核酸級聯(lián)侵入反應和納米金顆粒探針雜交檢測。優(yōu)化反應體系和反應條件后進行敏感性和特異性實驗,并與Real-Time PCR檢測方法進行比較。 結(jié)果 以核酸級聯(lián)侵入反應和納米金顆粒探針顯色技術(shù)檢測LAMP擴增產(chǎn)物和毛細管電泳法具有相同的敏感性和特異性;LAMP結(jié)合核酸級聯(lián)侵入反應和納米金探針顯色技術(shù)的檢測敏感性為10 copies DNA分子/反應,且與其他病原體之間無交叉反應。在臨床樣本檢測方面,LAMP結(jié)合核酸級聯(lián)侵入反應和納米金探針顯色技術(shù)與Real-Time PCR檢測效果相當。 結(jié)論 結(jié)合LAMP、核酸級聯(lián)侵入反應和納米金探針顯色技術(shù)建立的N.men檢測方法靈敏、特異,無需特殊儀器,適用于基層檢測和現(xiàn)場快速檢測。
注:因版權(quán)方要求,不能公開全文,如需全文,請咨詢雜志社。
江蘇預防醫(yī)學雜志, 雙月刊,本刊重視學術(shù)導向,堅持科學性、學術(shù)性、先進性、創(chuàng)新性,刊載內(nèi)容涉及的欄目:疾病防治、論著、衛(wèi)生管理與健康促進、衛(wèi)生監(jiān)督監(jiān)測、少兒婦幼衛(wèi)生、綜述、專題論著、衛(wèi)生檢驗與實驗研究、性病艾滋病防治等。于1990年經(jīng)新聞總署批準的正規(guī)刊物。