杜仲EuCHIT1基因表達(dá)載體構(gòu)建及在大腸桿菌中的表達(dá)
摘要：構(gòu)建了T7啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)杜仲幾丁質(zhì)酶基因EuCHIT1的原核表達(dá)載體pET-EuCHIT1和pMCSG-EuCHIT1,其表達(dá)產(chǎn)物分別含6個(gè)組氨酸(6His)標(biāo)簽和6個(gè)組氨酸連接的麥芽糖結(jié)合蛋白(his6-tag–maltose-binding protein,MBP)標(biāo)簽,分別將重組載體遺傳轉(zhuǎn)化大腸桿菌細(xì)胞BL21(DE3),在37℃、150 rpm條件下培養(yǎng)至菌液OD值為0.4~0.8后,轉(zhuǎn)到16℃、150 rpm條件下以1 m MIPTG誘導(dǎo)培養(yǎng)12 h,表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)SDS-PAGE分析,p ET-EuCHIT1/BL21(DE3)表達(dá)以包涵體形式存在36.03 kD融合蛋白,pMCSG-EuCHIT1/BL21(DE3)成功表達(dá)可溶形式存在的77.21 kD融合蛋白。故可以使用pMCSG-EuCHIT1/BL21(DE3)獲得可溶的融合蛋白,為之后的EuCHIT1的多克隆抗體的制備和及功能研究奠定基礎(chǔ)。
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貴州大學(xué)學(xué)報(bào)·藝術(shù)版雜志
貴州大學(xué)學(xué)報(bào)·藝術(shù)版雜志， 雙月刊，本刊重視學(xué)術(shù)導(dǎo)向，堅(jiān)持科學(xué)性、學(xué)術(shù)性、先進(jìn)性、創(chuàng)新性，刊載內(nèi)容涉及的欄目：名家論談、藝術(shù)理論與批評(píng)_“藝術(shù)與空間”專題、影視藝術(shù)_“海外譯稿”專題、書法專題、本土藝術(shù)等。于1987年經(jīng)新聞總署批準(zhǔn)的正規(guī)刊物。
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