摘要：目的:建立能同時檢測糞便中溶組織內阿米巴、迪斯帕內阿米巴和莫氏內阿米巴原蟲的巢式多重PCR方法;方法:根據溶組織內阿米巴、迪斯帕內阿米巴和莫氏內阿米巴原蟲16S rDNA基因序列,設計1對阿米巴屬原蟲保守引物和3對不同內阿米巴原蟲特異性引物,通過反應體系優(yōu)化及特異性、敏感性等建立了巢式多重PCR方法,并對部分臨床樣本進行了檢測;結果:該巢式多重PCR方法能特異性擴增溶組織內阿米巴、迪斯帕內阿米巴和莫氏內阿米巴原蟲目的片段,特異條帶大小分別為439、174、553 bp,區(qū)分明顯;該方法可檢測糞便樣品中阿米巴原蟲滋養(yǎng)體的最小值約為20個,在固定其它兩種內阿米巴原蟲滋養(yǎng)體細胞數量的情況下,該方法最低能分別檢測到0.01個E.histolytica、1個E.dispar和0.1個E.moshkovskii滋養(yǎng)體。臨床樣本的檢測也顯示巢式多重PCR方法與單一PCR具有較高的一致性。結論:巢式多重PCR方法具有高度的特異性和敏感性,其在溶組織內阿米巴、迪斯帕內阿米巴和莫氏內阿米巴原蟲的診斷和流行病學調查中具有重要的應用價值。